一、目的要求
(一)透過對動物、植物細胞的觀察，掌握光鏡下細胞和細胞器的基本形態結構。
(二)初步掌握臨時製片的方法。
(三)學習生物顯微繪圖的方法。
二、實驗用品
(一)材料：蛙表皮玻片標本、神經細胞玻片標本、卵巢切片標本、人精子塗片標本、平滑肌裝片標本、脊神經節切片標本、大白鼠胰腺切片標本、馬蛔蟲子宮橫切片標本、洋蔥鱗莖、大白鼠精子塗片、口腔上皮細胞。
(二)器材：光學顯微鏡、解剖刀、鑷子、剪刀、解剖針、載玻片、蓋玻片、牙籤、吸水紙、擦鏡紙、紗布。
(三) 試劑: 2%碘液、Giemsa染液。
三、內容與方法
(一)臨時玻片標本的製片與觀察
1.洋蔥鱗葉表皮細胞製片與觀察
取一洗淨的載玻片，以左手拇指及中指夾住載玻片的兩端，右手拇指及食指夾住紗布，輕輕擦拭玻片的兩面，直到透明為止。
蓋玻片的擦拭方法與載玻片相同，但蓋玻片小而薄，擦拭時須格外小心，用力要均勻，否則容易破碎。
在載玻片中央滴一滴清水，在洋蔥地下莖鱗葉的內側面(即凹的一面)有一層膜狀的半透明的表皮，用鑷子輕輕撕下2~3mm²大小的表皮一塊，置載玻片水滴上，鋪平，輕輕蓋上蓋玻片(加蓋玻片的方法：用鑷子輕輕夾住蓋玻片的一側或用拇指、食指夾住兩側，使蓋玻片的另一側先接觸水滴，然後逐漸放下蓋玻片，至完全平放在標本上為止)。置顯微鏡下觀察，先用低倍鏡再用高倍鏡觀察，可見許多長柱狀排列整齊，彼此相連的細胞，其內有時可見到圓形的核。
在蓋玻片一側的邊緣加碘液1滴(注意：不要將碘液加在蓋玻片上)，用吸水紙從相對的一側吸水，引染液入蓋玻片內，在低倍鏡下選擇一個較典型的細胞，移至視野中央，再轉換高倍鏡仔細觀察以下結構：
(1)細胞壁(cell wall)：為細胞最外面的一層由纖維素組成的較厚的壁(它是植物細胞的重要特徵之一)。細胞膜位於細胞壁內側並與其緊密相貼，光學顯微鏡下不易分辨。
(2)細胞核(nucleus)：多位於細胞中部，染為深黃色的圓形或橢圓形結構，核內有一個或者幾個顆粒狀的核仁(nucleolus)。
(3)細胞質(cytoplasm)：是細胞膜與細胞核之間的區域，其中有時可看到點狀或泡狀的液泡。
2.人口腔黏膜上皮細胞製片與觀察
在清潔的載玻片中央滴一滴碘液。用牙籤的寬頭輕刮自已口腔下唇的內側或兩側頰部的上皮，將刮下的黏膜細胞洗於玻片碘液中(可能肉眼覺察不到)，輕輕攪動，使細胞散開。蓋上蓋玻片，蓋玻片與載玻片之間不能有氣泡，也不能讓碘液溢位蓋玻片，如有多餘的碘液，用吸水紙吸去。
將制好的臨時玻片標本置於顯微鏡的載物臺上，先用低倍鏡觀察，可見被染成黃色的細胞，成群或分散存在。選擇完整而輪廓清楚沒有重疊的細胞移至視野中央，再轉高倍鏡觀察以下結構：
(1)細胞膜(cell membrane)：細胞呈扁平形，細胞的外面有一層薄膜叫細胞膜(如鋪展不好，則細胞膜會出現皺褶)。
(2)細胞核：位於細胞中部，染色較深，呈圓形或橢圓形，核中可見一致密的結構，即為核仁。
(3)細胞質：是細胞膜與細胞核之間的區域，染色較淺。
3.大白鼠的精子塗片及觀察
取大白鼠的附睪頭從中橫切為兩段，用鑷子夾住，讓切面在載玻片上輕輕塗(用力均勻不要太大，否則易使精子頭部掉脫)。待幹後，用吸管吸入Giemsa染液，不同種類脊椎動物的精子滴於塗片上，染色20分鐘，用水沖洗，然後插入玻片板上，待幹進行觀察。鏡下可見，大白鼠的精子由頭部、中部和尾絲三部分構成。
4.蟾蜍(或蛙)血塗片的製備與觀察。
將蟾蜍用乙醚麻醉後，剪開胸腔，開啟心包，取心臟血滴一滴在潔淨的載玻片一端，另取一塊邊緣平整的載玻片照做成較薄的血塗片晾乾。先在低倍鏡下，再用高倍鏡觀察。辨認紅細胞，呈橢圓形，淺橙紅色，中部可見一橢圓形的核。其他細胞不辨認。
(二)細胞形態的觀察
1.扁平上皮細胞
取蛙表皮玻片標本，在低倍鏡下觀察，可見染成藍綠色的薄膜，這是從蛙體表剝落下來的一層表皮。低倍鏡下觀察，可見染成深藍色的圓形或橢圓形結構，這是細胞核，圍繞細胞核的是細胞質，在細胞質的外圍有深染的線條，分隔各個細胞，可見蛙表皮細胞為排列緊密的多邊形細胞。
2.圓形細胞
取卵巢切片標本，置低倍鏡下觀察，在標本的外周部分可見到一些較普通細胞大很多的圓形卵細胞，呈淡紅色。換高倍鏡觀察，可見卵細胞被染色較深的透明帶包繞，透明帶外又被染成紅色的細胞圍繞，稱為放射冠。由於切片的原因，在視野中也可能看到沒有經過細胞核的切面，因而只觀察到細胞質而看不到細胞核。此外，成熟的卵細胞還可觀察到卵泡腔。
3.蝌蚪形細胞
取人精子塗片低倍鏡觀察、可見許多染成紅色的小粒，即為人的精子，轉換高倍鏡觀察，可觀察到很多蝌蚪形細胞的精子，著色較深的圓形部分為頭部，內有細胞核。細長的部分稱為尾部，在頭部與尾部之間有很短的頸部，但在標本上不易區分。
4星形細胞
取神經細胞染色標本在低倍鏡下觀察，可見許多分佈不均勻，著色很深並呈不規則突起的神經細胞，然後換高倍鏡觀察。
5.梭形細胞
取平滑肌分離裝片標本觀察，可見染成紅色的呈梭形的細胞，此為平滑肌細胞，細胞中央染成淡藍色的為細胞核，多呈圓形或橢圓形。
(三)光鏡下細胞器的觀察
1.高爾基複合體(Golgi complex)
取豚鼠或家兔的脊神經節切片標本，觀察高爾基複合體。用特殊的染色方法，使細胞質和其中的高爾基複合體著色，細胞核不著色。先用低倍鏡觀察，可見許多黃色橢圓形或不規則形的神經細胞。找出細胞輪廓清楚的部位，轉高倍鏡觀察，可見細胞的中央有一個不著色的圓形區域，即為細胞核。有些細胞核中可以看到黃色的核仁。在細胞核周圍有些顆粒狀、斑塊狀及扭曲的條索狀結構，它們共同組成類似細網狀結構，分佈在胞質中，被染成黃褐色或棕黑色，這就是高爾基複合體。在視野中也可能看到沒有經過細胞核的切面，該細胞內高爾基複合體就好像散佈在整個細胞質中。
2.線粒體(mitochondria)
(1)勞弗氏快藍染色法
取用勞弗氏快藍染色的切片，先用低倍鏡找到有細胞處，轉高倍鏡觀察，可見核仁被染成紅色，核質不著色，線粒體則染成藍綠色。另外還可觀察到染成紫紅色或紫色的酶原顆粒，呈堆狀分散在細胞中。
(2)蘇木精染色法
取大白鼠胰腺切片，先用低倍鏡找到細胞顏色較淺處，細胞輪廓較清晰的地方（由於細胞膜不著色，細胞輪廓不易分清)，轉高倍鏡觀察，胞核中有1~2個染成藍綠色的小粒，這是核仁，胞質中有許多染成藍色的細小粒狀或線狀結構，有的集中在細胞某一區域，有的分散在整個細胞質中，這就是線粒體。
3.中心體(centrosome)
取馬蟲子宮橫切片，觀察馬蟲子宮中受精卵分裂中期細胞，可見染色體染成黑色，呈粗線狀，排列於細胞紡錘體中間的赤道面上。在染色體兩側各有一個被染成黑色的小粒，叫中心粒(centriole)，在中心粒周圍還有一團比較緻密的物質叫中心球(centrosphere)，中心粒和中心球合稱為中心體。兩個中心粒之間絲狀的結構，稱為紡錘體。在視野中，有時觀察到只有一側有中心體存在。
四、作業與思考題
(一)作業
1.繪口腔上皮細胞、洋蔥表皮細胞圖，並註明各部分名稱。
2.繪所觀察的各種細胞形態圖，並註明各部分名稱。
3.繪脊神經節細胞圖，寫出各結構名稱。
(二)思考題
1.洋蔥表皮細胞在光鏡下，細胞核一般位於什麼部位？什麼形狀？染成了什麼顏色？
2.觀察平滑肌分離裝片標本，平滑肌細胞被染成什麼顏色？呈什麼形狀？
3.用勞弗氏快藍染色法染色的大白鼠胰腺切片中，如何區分線粒體與酶原顆粒？